Главная » Каталог документов » ГОСТ 13496.21-87

ГОСТ 13496.21-87
"Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения лизина и триптофана"

- 244,00 руб.;
- Официальное издание;
- Доставка или cамовывоз.
- от 95,00 руб./день;
- Мгновенное подключение;
- Различные формы оплаты.
- от 8 790,00 руб.;
- Тысячи (!) документов на DVD;
- Ежеквартальное обновление.

Статус документа: действующий

Дата вступления в действие: 1988-07-01


Документ относится к следующим разделам классификатора:

Нормативно-технические документы. Национальные стандарты
Сельское хозяйство
Корма для животных * Микробиология кормов для животных см. 07.100.30


Содержание для ознакомления



ВНИМАНИЕ!!
ФРАГМЕНТ ТЕКСТА ДОКУМЕНТА ПРЕДСТАВЛЕН ИСКЛЮЧИТЕЛЬНО ДЛЯ ОЗНАКОМЛЕНИЯ И СОДЕРЖИТ ОШИБКИ
ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА СООТВЕТСТВУЕТ ОФИЦИАЛЬНОМУ ИЗДАНИЮ

Группа С19

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Методы определення лизина н триптофана

Feeds, mixed feeds and ran material. Methods for determining content of lisin and tryptophane

ОКСТУ 9209

Даш введения 01.07.88

Настоящий стандарт распространяется на осе виды кормов, комбикорма и комбикормовое сырье и устанавливает хроматографические и колориметрический методы определения в них аминокислот лизина и триптофана.

Стандарт предназначается для научно-исследовательских учреждений, лабораторий агрохимической службы, республиканских и зональных лабораторий комбикормовой промышленности.

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1. Отбор проб - по ГОСТ 13496.0, ГОСТ 13586.3. ГОСТ 13979.0. ГОСТ 17681.

2. МЕТОД ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (НА АВТОАНАЛИЗАТОРЕ АМИНОКИСЛОТ)

2.1. Сущность метода заключается в расщеплении пептидных связей белка соляной кислотой или щелочью при нагревании и избирательной сорбиии аминокислот на ионообменннкс жидкостной хроматографической колонки. При реакции с нингидриновым реАКТивом образуется окрашенный комплекс, интенсивность которого пропорциональна содержанию аминокислоты в растворе.

2.2. Средства испытаний

Дпя проведения испытания применяют; измельчитель проб растений ИПР-2;

сушилку проб кормов СК-1 или шкаф сушильный лабораторный, обеспечивающий погрешность поддержания температуры не более 5 "С: мельницу лабораторную марки МРП-2; сито с отверстиями I к I мм иди диаметром 1 мм,

весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с пределом взвешивания 200 и 500 г по ГОСТ 24104*;

автоклав по ГОСТ 14106;

шкаф сушильный типа СЭШ-ЗМ или аналогичный с рабочей температурой 110 'С, максимальным перепадом температур 2 *С и периодическим колебанием температур в рабочей зоне ±0,5 "С: аминокислотный анализатор; устройство для выпаривания гндродизатов УВГ-1; холодильник бытовой; рН-четр 340;

дозатор стеклянный вместимостью 10 см1;

газовую горелку однопламенную универсальную по ГОСТ 1077;

баллон с газом пропан-бутан;

ампулы стеклянные с перетяжкой вместимостью 20 см' по ГОСТ 21400;

* С 1 июли 2002 г. вводится в действие ГОСТ 24104-2001 (>лссь » далее). 11 ii:imu- официальное Перепечатка воспрещена

ГОСТ 13496.21-87

139
С. 2 КК Г 1Л496.21-87

колбы мерные исполнении I и 2 вмесгачеялъю 50. 100. 1000 см' 2-го класса точности но ГОСТ 1770:

пробирки стеклянные нместнмостыо 20 см-' по ГОСТ 1770;

пипетки градуированные исполнений I. 2. 4. 5. б вместимостью I. 2. 5. 10 см' 2-го класса точности по ГОСТ 29227;

воронки стеклянные ;шлме!ром 4 6 см по ГОСТ 25336; ступку фарфоровую;

фильтры беззольные с синей полосой диаметром 8 см но ГОСТ 12026; набор реАКТивов к аминокислотному анализатору; набор аминокислот стандартный;

кислоту соляную кониенгоигкчинную по ГОСТ 3118. х. ч. н раствор солянок кнеюты с концентрацией 6 моль/дм1; готовя г смешиванием равных объемов концентрированной соляной кнеюты и диспилнрованнон воды (1:0:

спирт лиловый по ГОСТ 5962";

бария гидроокись, 8-водную по ГОСТ 4107. х. ч.;

натрий углекислый бе (водный по ГОСТ 83, х. ч.. раствор с массовой долей 10 %; натрий лимоннокислый грехтамешенный по ГОСТ 22280. х. ч. илн ч. а. а.; фенол;

натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х. ч.. раствор с массовой долей 50 %; пропанол-2 (иэопропилоиый спирт»; волу i.K Iиллнрованную по ГОСТ 6709.

Примечание. Долускаеки иегютьинитъ аппаратуру, мерную посулу- или лрутис мерные средства измерений, имеющие анаммнчные иилрптошчесъис харАКТернстики.

2.3.1. Подготовка проб

Среднюю пробу сена, сенажа, соломы илн зеленой массы, отобраннуто по ГОСТ 27262. измельчают на отрезки длиной до 1-Зсм. Корнеплоды разрезают на пластинки (ломтики) тшшииой до 0.8 см. Методом квартований выделяют часть средней пробы, масса которой после высушивании должна быть нс менее 100 г. Высуши шише проб проводят и сушильном шкафу при температуре 60 -65 'С до воздушно-сухою состояния. После высушивании вомушно-сухую пробу размалывают ни мельнице и просеивают через сто. Остаток на сите и (мельчают ножницами или и ступке, добавляют к просеянной части и гшателыю перемешивают.

( гчмине пробы комбикормов, к-рна. жмыхов, шротов, (рану i. гравяной цукм или югаминной муки in jpeiieuioii зелени ixitMa.iun.ikn бет предваршелыют полсушнилнин и просеиваю i чере i сито

Подтотоктенные пробы хранят в стеклянной нлн пласт массовой банке с крышкой в том тем1юм месте.

2.3.2. Приготовление растворов н рсАКТнаов

2.3.2.1. Приготол.1ение буферном раствора с рН 2.2

19.6 I лимоннокислого грех замешенного натрия растворяют и 200—300 см5 дистиллированной волы, приливают 16,6 см1 концентрированной соляной кислслТн, I cmj фенола и объем доводят ло I дм" в мерной колбе дистиллированной водой. Концентрацию водородных ионов контролируют иа рН-мегрс и при необходимости корректируют раствором гидроокиси натрия с массовой долей 50 % илн концентрированной соляной кислотой.

2.3.2.2. llpuetrniotuenue нейтраипунщего раствора

10 f гидроокиси натрия растворяют в буферном растворе с рН 2.2. охлаждают н доводят объем до метки в мерной колбе вместимостью 100 см'.

2.3.2.3. Нриготолнгние стандартного раствора ли шла

Навеску (156Ю.1) мг монохдорида лизина растворяют а 50 см' соляной кислоты с кон центра-имей 0.1 мать/дм' (3.1 см» концентрированной соляной кнслоты рлепюряют в I0O0 см1 дистиллированной волы). I см' такого раствора содержит 2.5 мг чистого лизина.

2.3.2.4. Ириготов.1ение стишн1ртно<эч> раствора триптнрана

Навеску (125±0,1) мг триптофана растворяют в водном рас пюре изопропанола (1:9) в мерной КОЛбе вместимостью 50 см1. I см1 такого раствора содержит 2.5 мг триптофана.

Рабочие стандартные растворы аминокислот готовят из основных разведением в 6уг|н:рс с рН 2.2 для лизина и водном растворе изопропанола — для триптофана.

4 В Росс и не кой Федерации действует ГОСТ Р 51652-2(100 )UCe. и далее!.

140
ГОСТ 13496.21-87 С. 3

2.4. Проведение испытания

2.4.1. Подготовка гидролизатов

2.4.1.1. Проведение кислотного гидролиза в растворе самной кислоты концентрации 6 моль/дм1 для определения лизина

а) Гидролиз в ТЕРМостате

Навеску воздушно-сухого корма массой (100*0.1) мг аккуратно переносят на дно ампулы с перетяжкой, добавляют 2—3 капли этилового спирта и дозатором приливают 10 см" раствора 6 моль/дм' соляной кислоты. Ампулу запаивают в пламени газовой горелки в месте перетяжки, устанавливают в штатив и помешают в предварительно нагретый до температуры 110 "С сушильный шкаф на 24 ч. После завершения пиролиза ампулы охлаждают до комнатной температуры, взбалтывают и содержимое переносят на беззольный фильтр.

2 см3 фильтрата выпаривают досуха и осадок растворяют в 10 см1 буферного раствора с рН 2.2 или добавляют 5 с\г нейтрализующего раствора. Содержимое перемешивают. Гндролнзат готов для нанесения на хроматографическую колонку.

б) Гидролиз в автоклаве

Навеску воздушно-сухого корма массой (100±0.1) мг аккуратно переносят на дно пробирки вместимостью 20 см1, доба&зяют 2—3 капли этилового спирта и дозатором приливают 10 см' раствора 6 моль/дм' соляной кислоты. Пробирки закрывают стеклянными колпачками или воронками для пред отвращения разбрызгивания кислоты во время гидролиза и помешают в автоклав. Гидролиз проводят при давлении 0,25 МПа и температуре 137 "С в течение 3 ч. После завершения гидролиза пробирки охлаждают до комнатной температуры, осторожно взбалтывают и содержимое переносят на беззольный фильтр. 2 см'фильтрата выпаривают досуха и приливают 10 см1 буферного раствора с рН 2,2 или добавляют 5 см-1 нейтрализующего раствора. Содержимое перемешивают. Гндролнзат готов для нанесения иа хроматографическую колонку.

2.4.1.2. Проведение гидрашза с гидроокисью бария для определения содержания триптофана Навеску воздушно-сухого корма массой (200г0,1) мг аккуратно переносят на дно ампулы с

перетяжкой, добавляют 2—3 капли этилового спирта, 1,6 г свежерастертой в фарфоровой ступке гидроокиси бария и содержимое тщательн

-=ОКОНЧАНИЕ ФРАГМЕНТА ДОКУМЕНТА=-

Документ ГОСТ 13496.21-87 можно получить тремя способами:

Приобрести полный комплект актуальных документов в виде электронного справочника на DVD. Мы предлагаем специализированные справочники для разных отраслей хозяйственной деятельности.

Так же, можно скачать ГОСТ 13496.21-87 или любой другой документ очень быстро и за смешные деньги, с оплатой любым способом (электронными деньгами, безналичным расчетом, отправкой SMS).

Если требуется официальное издание, то можно купить ГОСТ 13496.21-87 - печатную форму документа для технических библиотек и лицензирования деятельности предприятия.