ГОСТ 13496.6-71
"Комбикорм. Метод выделения микроскопических грибов"
Статус документа: действующий
Дата вступления в действие: 1972-01-01
Документ относится к следующим разделам классификатора:
ВНИМАНИЕ!!
ФРАГМЕНТ ТЕКСТА ДОКУМЕНТА ПРЕДСТАВЛЕН ИСКЛЮЧИТЕЛЬНО ДЛЯ ОЗНАКОМЛЕНИЯ И СОДЕРЖИТ ОШИБКИ
ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА СООТВЕТСТВУЕТ ОФИЦИАЛЬНОМУ ИЗДАНИЮ
Группа С19
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
КОМБИКОРМ Метол выделения микроскопических грибов
Mixed Teed. Method ofdcfnchmenl of fungi
ОКСТУ 9209
Дета введении 01.»1.72
Настоящий стандарт распространяется на все вилы комбикормов и устанавливает метод выделения микроскопических грибов из них.
Сущность метола заключается в посеве разбавленных взвесей комбикормов на питательные среды (метод разливки).
Метол основан на свойстве микроскопических грибов расти при определенных условиях на специально приготовленных питательных средах (агаре Чапека или сусловом агаре).
(Измененная редакция, Изм. № 1).
I. ОТБОР ПРОБ
1.1. Отбор проб комбикормов производят по ГОСТ 13496.0.
2. АППАРАТУРА И РЕАКТИВЫ
2.1. Для проведения испытания применяют:
автоклав;
шкаф сушильный:
мельницу лабораторную электрическую;
весы лабораторные по ГОСТ 24104'. 2-го класса точности с пределом взвешивания до 0.01 г; аппарат для встряхивания жидкостей (шюттель-аппарат); ТЕРМостат с автоматическим ТЕРМорегулятором: бокс для посевов; баню водяную:
чашки стеклянные лабораторные типа чБН (чашки Петри) по ГОСТ 25336; колбы стеклянные вместимостью 500 см' по ГОСТ 25336:
мензурки или цилиндры мерные вместимостью 500 см', 1000 см1 по ГОСТ 1770; пипетки химические градуированные вместимостью I см', 2 см3 с иеной деления 0,1 сч! с широким концом по ГОСТ 29227;
пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;
воронки стеклянные диаметром 100 мм по ГОСТ 25336;
ареометр Баллинга;
горелку газовую или спиртовую;
бумагу универсальную индикаторную;
вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;
марлю медицинскую по ГОСТ 9412;
глюкозу по ГОСТ 6038;
калий фосфорнокислый од ноза мешенный по ГОСТ 4I9X;
* С 1 июля 2002 г. вводится в действие ГОСТ 24IO4-2O01
Издание официальное Перепечатка воспрещена
?
ГОСТ 13496.6-71
49
С. 2 ГОСТ 13496.6-71
натрии азотнокислый по ГОСТ 4168;
магний сернокислый по ГОСТ 4523;
калий хлористый по ГОСТ 4234;
железо сернокислое закисное, но ГОСТ 4148;
агар-агар по ГОСТ 17206;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
воду водопроводную;
пенициллин (натриевая и калиевая соль бен зил пенициллина); стрептомицин (стрептомицина сульфат); сусло пивное неохмеленное с 12—14 % Сахаров; поверхностно-АКТивное вещество ОП-7; поверхностно-АКТивное вещество ОП-10; поверхностно-АКТивное вещество Твин-80. (Измененная редакция, Изм. № I, 2).
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. В состав агаризировашюй среды Чапека (агара Чапека) входят следующие компоненты: глюкоза — 30.0 г;
натрий азотнокислый — 2,0 г;
калий фосфорнокислый однозамешейный — 1,0 г;
магний сернокислый — 0.5 г;
калий хлористый — 0,5 г;
железо сернокислое закисное — 0,01 г;
вода дистиллированная — 1000 см;
агар-агар — 20—30 г.
3.2. Для приготовления агара Чапека берут 20—30 г агар-агара, заливают его 1000 см1 водопроводной воды и вымачивают 2 ч при комнатной температуре. Волу слипают и измеряют ее объем для определения количества воды, впитавшейся агаром. Затем агар промывают 2—3 раза дистиллированной водой.
Взвешивают остальные компоненты среды и растворяют их в таком объеме дистиллирован ной воды, который составляла слитая при вымачивании агара вода. К полученному раствору добавляют отмытый агар-агар, после чего варят среду в автоклаве текучим паром в течение I ч.
3.3. Полученную среду фильтруют, разливают по колбам и стерилизуют в автоклаве при давлении 0.05 МПа в течение 20 мин; рН питательной среды должен быть в пределах 6,0—6.8.
3.4. Для приготовления суслового агара неохмеленное пнвпое сусло, содержащее 12—14 % Сахаров, фильтруют через тонкий слой ваты или 3—4 слоя марли, разбавляют дистиллированной водой (1:2 или 1:3) до 4—7" по ареометру Баллннга. затем лоба&зяют 2 % агар-агара. Разливают по колбам и стерилизуют в автоклаве при температуре 110—112 "С и давлении 0,05 МПа в течение 20 мин.
3.5. Перед посевом питательный агар расплавляют в водяной бане, затем после охлаждения ло 45—50 "С для подавления сопутствующей бАКТериальной флоры добавляют антибиотики — пенициллина 50000 ЕД и стрептомицина 100000 ЕД на I дм1 среды. После этого агар разливают в стерильные чашки Петри и лают остыть иа горизонтальной поверхности. Стой агара должен быть не менее 0.5 см.
3.3-3.5. (Измененная редакцня, Изм. №1,2).
3.6. Размол образца гранулированного или брикетированного комбикорма производят на лабораторной мельнице.
3.7. Для приготовления разбавленной взвеси 10 г размельченного комбикорма помешают в колбу с 100 см' стерильного 0,1 %-ного раствора поверхностно-АКТивного вещества (ОП-7. ОП-10, Твин-80) в дистиллированной воде. Таким образом получают первичную взвесь I (1:10). Прежде чем приступить к разбавлению первичной взвеси, проводят дезинтеграцию пробы в колбе встряхиванием в течение 15—20 мин на шюгтель-аппарате. Затем из взвеси I готовят последующие разведения, используя также стерильные растворы вышеназванных поверхностно-АКТивных веществ, следующим способом: I см' взвеси берут стерильной градуированной пипеткой (коней пипетки следует отрезать для свободного прохождения частиц комбикорма, после чего пипетка должна быть от калибрована на 1 см'), приливают в пробирку с 9 см' раствора и получают взвесь 2 (1:100). Из
SO
ГОСТ 13496.6-71 С 3
полученной взвеси 2 готовят таким же образом взвесь 3 (1:1000), и, если необходимо, взвесь 4 (1:10000). Перед взятием очередной порции взвеси как для получения дальнейшего разведения, так и для посева, необходимо тщательно перемешивать взвесь пипеткой, а также промыть пипетку во взвеси не менее 5 раз.
(Измененная редакция, Изм, № 1)«
3.8. Степень разбавления основной взвеси зависит от органолептических показателей комбикорма. Комбикорм с НОРМАльными органодептическими показателями разбавляют 1:1000, подвергшийся порче — 1:10000.
3.9. Для предупреждения загрязнения посевов применяемая посулд должна быть стерильной. Стерилизацию чашек и пипеток, завернутых в бумагу, проводят в сушильном шкафу при температуре 140—160 X в течение 2 ч. Все процессы, связанные с разливкой питательных сред, приготовлением разбавленной взвеси комбикорма, посевом ее на питательную среду, должны проводиться в стерильных условиях — около пламени горелки в специальном боксе.
(Измененная редакция, Изм. № h.
4. ПРОБОДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
4.1. Посев производят сразу же после приготовления последней взвеси (3 или 4), не давая ей отстояться, при этом I см1 ее равномерно распределяют по всей поверхности питательной среды, слегка наклоняя чашки Петри в разные стороны.
(Измененная редакция, Изм, № I),
4.2. Число засеянных чашек зависит от выбранной степени разбавления: 5 чашек при разбавлении 1:1000 н & чашек — при разбавлении 1:10000.
4.3. Посевы инкубируют в ТЕРМостате при 22—25 "С в течение 5—7 суг. Рост и спороношение большинства грибов, коитамннируюших комбикорма, становится заметным уже через 2—3 сут.
(Измененная редакция, Изм, № I, 2),
4.4. (Исключен, Изм, № I).
5, ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. Обработку результатов испытания и оценку санитарно-микологического качества комбикорма проводят в соответствии с ПРАВИЛАми саннтарно-микологическнх исследований кормов, утвержденными в установленном порядке.
Разд. 5. (Введен дополнительно, Изм. № I).
51
С. 4 ГОСТ 13496.6-71
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством сельского хоти..,.., СССР
2. УТВЕРЖДЕН И В ВЕДЬ II В ДЕЙСТВИЕ ПОСТАНОВЛЕНИЕм locyupciecHiioiu комитета стандартов Совета Минн. 1СССР от 25.12.70 № 233
3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТ Ы
Обо пион» НТД. пл «отрыв iiNi tcMiu
Н*нр.гв«.
ГОСТ 1770-74
2.1
ГОСТ 4148-78
2.1
ГОСТ 4168-79
2.1
ГОСТ 4198-75
2.1
ГОСТ 4234- 77
2.1
ГОСТ 4523-77
2.1
ГОСТ 5556-81
2.1
ГОСТ 6038-79
2.1
ГОСТ 6709- 72
3.1
ГОСТ 9412—93
2.1
ГОСТ 13495.0-80
1.1
ГОСТ 17206-96
2.1
ГОСТ 24104-ХК
2.1
ГОСТ 25336-82
2.1
-=ОКОНЧАНИЕ ФРАГМЕНТА ДОКУМЕНТА=-
Документ ГОСТ 13496.6-71 можно получить тремя способами:
Приобрести полный комплект актуальных документов в виде электронного справочника на DVD. Мы предлагаем специализированные справочники для разных отраслей хозяйственной деятельности.
Так же, можно скачать ГОСТ 13496.6-71 или любой другой документ очень быстро и за смешные деньги, с оплатой любым способом (электронными деньгами, безналичным расчетом, отправкой SMS).
Если требуется официальное издание, то можно купить ГОСТ 13496.6-71 - печатную форму документа для технических библиотек и лицензирования деятельности предприятия.