Главная » Каталог документов » ГОСТ 28396-89
ГОСТ 28396-89
ВНИМАНИЕ!!
ФРАГМЕНТ ТЕКСТА ДОКУМЕНТА ПРЕДСТАВЛЕН ИСКЛЮЧИТЕЛЬНО ДЛЯ ОЗНАКОМЛЕНИЯ И СОДЕРЖИТ ОШИБКИ
ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА СООТВЕТСТВУЕТ ОФИЦИАЛЬНОМУ ИЗДАНИЮ
Группа С19
ЗЕРНОВОЕ СЫРЬЕ, КОМБИКОРМА
Метол определения патулина
Grain raw material, mixed Ibcklcrs. Method for determination of patulin
ОКХТУ 9296
Дата висаеимя 01.07.90
Настоящий стандарт распространяется на фуражное зерно, продукты его переработки, комбикорма и устанавливает метод определения патулина.
Сущность метода заключается в экстракции патулина из исследуемой пробы корма хлороформ — метанолом, очистке экстрАКТа колоночной хроматографией с последующим полуколичествеиным определением его концентрации методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) путем визуального сравнения пятен.
Минимальный уровень обнаружения патулина 10 нг.
Минимальный открываемый уровень метода 100 мкгкг~ '.
Извлечение = 90 %.
I. ОТБОР ПРОБ
Orfjop проб - по ГОСТ 12430, ГОСТ 13496.0 и ГОСТ 13586.3.
2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ
Аппликатор слоев.
Камера хроматографическая.
Микрошприцы вместимостью 10—50 мм5 с градуировкой I мм3.
Пластинки стеклянные размером 200 x 200 мм.
Пульверизатор для жидкостей.
Гомогенизатор (измельчитель лабораторный).
Сито, обеспечивающее получение фракции не более 2 мм.
Источник УФ-излучения с длиной волны 330—360 им.
Аппарат для встряхивания.
Спектросротометр. обеспечивающий измерение в области длин волн 250—400 им. Шкаф сушильный, обеспечивающий регулирование температуры до 150 *С. Испаритель вакуумный роторного типа.
Весы технические с погрешностью взвешивания не более 100 мг. Весы аналитические с погрешностью взвешивания не более 0.1 мг. Воздухонагреватель (фен). Пульверизатор для жидкости стеклянный.
Баня водяная, обеспечивающая регулирование температуры до 100 'С. Насос водоструйный или другой вакуумный насос.
Колонка хроматографическая с краном, внутренним диаметром 20 мм и длиной 300 мм. Стакан В-1 -250 ТСХ по ГОСТ 25336.
ГОСТ 28396-89
Идоние офнинальнос
Перепечатка воспрещена
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
liihii-iiihjh версия
ГОСТ 28396-89 С. 2
Воронка Бюхнера диачетроч 10 си с колбой для отсасывания по ГОСТ 9147. Колбы Эрленчейера с притертой пробкой КН-1-250—14/23 ТС по ГОСТ 25336 и КН-1 -1000—14/23 ТС по ГОСТ 25336. Эксикатор 2-290 по ГОСТ 25336.
Воронки стеклянные 12-36-80 ХС и В-75-140 ХС по ГОСТ 25336. Колба мерная KI-100-2 по ГОСТ 1770. Цилиндры 1-25, 50. 100 по ГОСТ 1770.
Пипетки 2— I, 5, 10. 20 по НОРМАТИВно-технической документации.
Колба крутлодоиная с притертой пробкой К-1—250—29/32 ТС по ГОСТ 25336.
Колба Ьушена имеет им остью 500 см'.
Колба остродонная с притертой пробкой 0—25—14/23 ТС по ГОСТ 25336. Фильтры бумажные диаметром 7 и 10 см, со средней скоростью пропускания. Вата стеклянная.
Ангидрид уксусной кислоты по ГОСТ 5815. Ацетон по ГОСТ 2603.
Кислота муравьиная по ГОСТ 5848 с массовой долей 85-90 %. Бензол по ГОСТ 5955. Хлороформ по ГОСТ 20015.
¦ . 1.1.п.и ш.Lin. раствор; готовит следующим обраюч: растворяют 0.2 г о-лнани)илииа в 5 см1 муравьиной кислоты. >Фир ли лиловый. Эфир уксус ноэт иловый. Спирт этиловый по ГОСТ 5962.
Калия перманганат по ГОСТ 20490, раствор с массовой долей 1,5 %; готовят следующим образом: 1.5 г КМп04 растворяют и воле и доводят объем до 100 см3.
I и iiiK.iuMi, Д1м коли ii*.....ои хроматографии, готовят следующим обраюч: 80 г силнкаипм 60
с paiMcpou части от 0.63 до 0.20 ич сушат в течение I ч при 105 "С, посте остывания смешивают с 20 см' воды и встряхивают в ыкрыточ сосуде в течение 2 ч.
Сичнкагель для тонкослойной хроматографии, пластинки -Силуфол-.
Метанол по ГОСТ 6995.
Натрня сульфат беиюдныП по ГОСТ 4166.
Пнрнднн по ГОСТ 13647.
Кислота соляная по ГОСТ 857. раствор с массовой долей 10 56. Толуол по ГОСТ 5789. Детергента раствор, н-гсксаи.
Осушитель для эксикатора, нейтральный, например синий ie.ii,. Патулнн, аналитический стандарт. Азот или другой инертный iai
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИИ)
3.1. Приготовление хро чагографн ч ее к ой колонки
В хрочатографическую колонку на пористое стеклянное дно или стеклянную вату вносят 15 г енликагеля со смесью бен юл-укосный эфир в соотношении 3:1 по объему. После оседания силикагеля ихчншку растворителя лают стечь, следя за тем, чтобы поверхность стационарной фа оставалась покрытой растворителем.
3.2. Подготовка пластинок для тонкослойной хроматографии Тщательно моют пластики детергентом, обмывают последовательно проточной водой, затем
дистиллированной водой и этанолом и сушат на воздухе. С помошью ашиикатора наносят на пластинки равномерным слоем суспензию силикагеля в воде из РАСЧЕТа 35 г силикагеля в 70 см1 ¦оды для 5 пластинок. Толщина слоя должна быть 0.5 мм. После вотчиной сушки пластики АКТируют в сушилыюы шкафу при 110 "С в течение I ч и хранят в эксикаторе над нейтралышч осушителей.
С. 3 ГОСТ 28396-89
'Электронная версия
3.3. Приготовление растворителей для тонкослойной хроматографы и
Для проведения анализа готовят системы растворителей следующего состава:
I. Толуол — уксус ноэтиловый эфир-муравьи над кислота в объемных соотношениях 50:40:10.
II. Хлороформ-ацетон в объемных соотношениях 90:10.
III. Хлороформ-гексан-аиетон в объемных соотношениях 71:16:13.
IV. Бен юл-метанол-уксуснозтиловый эфир в объемных соотношениях 96:4:1.
V. Эфир диэтиловый.
3.4. Подготовка хроматографическоЙ камеры
В хроматографическую камеру вносят систему растворителя по п. 3.3. Толщина слоя приблизительно 8 мм. Заднюю стенку хроматографической камеры облицовывают фильтровальной бумагой, пропитанной растворителем.
3.5. Приготовление камеры для хлорирования
В хроматографическую камеру вносят 25 cmj соляной кислоты и 25 см' раствора перманганата катия и смешивают.
При этом крышка должна быть закрытой. Кроме того, в камеру ставят стеклянный предмет (например чашку Петри) для того, чтобы имелась повышенная площадка, на которую можно помещать ТСХ-пластинку, не Погружая ее в жидкость. Камеру готовят непосредственно перед проведением испытания.
3.6. Приготовление стандартного раствора патулина
Рабочий стандартный раствор патулина готовят из основного раствора. Основной раствор, содержащий 10 мкг/см1 патулина, готовят следующим образом: 1,0 мг патулина растворяют хлороформом и доводят объем до 100.0 см1.
Концентрацию патулина в основном растворе контролируют при помощи спектрофотометра. Для этого 5,0 см' основного раствора выпаривают досуха в вакуумном испарителе под азотом при 30—35 "С, сразу растворяют остаток н 5,0 см' этанола и измеряют поглощение основного раствора и этанола с толшиной поглощающего свет слоя 0,5 см при длине волны 275 им.
Концентрацию патулина (С), мкг/см'. вычисляют по формуле
„ Л - ЛУ- 1000- л:
где А — поглощение раствора патулина на длине волны 275 ни; М — молярная масса патулина, г/моль, равная 154; А — калибровочный коэффициент спектрофотометра: от 0.95 до 1,05;
с — молярный коэффициент поглощения патулина при длнне волны 275 им. равный 14600: D— длина оптического пути, см. Стандартный раствор, содержащий 2 мкг/см' патулина. готовят следующим образом: 20,0 см' основного раствора разбавляют хлороформом до 100,0 см'.
Основной и стандартный растворы патулина хранят в темной посуле при 4 'С. 3.7. Подготовка проб
Исследуемый ОБРАЗЕЦ корма измельчают, тщательно перемешивают и пропускают через
сито.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ
4.1. Получение экстрАКТа
10.0 г подготовленной пробы переносят в колбу Эрленмейера вместимостью 250 см1, добавляют 80 см-1 хлороФОРМА и 10 см' метанола, закрывают колбу и встряхивают при комнатной температуре в аппарате для встряхивания в течение I ч. Полученный экстрАКТ фильтруют через воронку Бюхнера, остаток трижды промывают порциями по 25 см' хлороФОРМА. Объединенные хлороформные экстрАКТы смешивают с безводным сульфатом натрия в количестве около 15 г и оставляют в закрытой колбе на I ч, периодически встряхивая. Затем сульфат натрия отделяют через складчатый фильтр и, во избежание потерь экстрАКТа, сульфат натрия промывают дважды порциями по 10 см' хлороФОРМА. Затем в круглодонной колбе в
-=ОКОНЧАНИЕ ФРАГМЕНТА ДОКУМЕНТА=-
ГОСТ 28396-89
"Зерновое сырье, комбикорма. Метод определения патулина"
Статус документа: действующий
Дата вступления в действие: 1990-07-01
Документ относится к следующим разделам классификатора:
ВНИМАНИЕ!!
ФРАГМЕНТ ТЕКСТА ДОКУМЕНТА ПРЕДСТАВЛЕН ИСКЛЮЧИТЕЛЬНО ДЛЯ ОЗНАКОМЛЕНИЯ И СОДЕРЖИТ ОШИБКИ
ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА СООТВЕТСТВУЕТ ОФИЦИАЛЬНОМУ ИЗДАНИЮ
Группа С19
ЗЕРНОВОЕ СЫРЬЕ, КОМБИКОРМА
Метол определения патулина
Grain raw material, mixed Ibcklcrs. Method for determination of patulin
ОКХТУ 9296
Дата висаеимя 01.07.90
Настоящий стандарт распространяется на фуражное зерно, продукты его переработки, комбикорма и устанавливает метод определения патулина.
Сущность метода заключается в экстракции патулина из исследуемой пробы корма хлороформ — метанолом, очистке экстрАКТа колоночной хроматографией с последующим полуколичествеиным определением его концентрации методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) путем визуального сравнения пятен.
Минимальный уровень обнаружения патулина 10 нг.
Минимальный открываемый уровень метода 100 мкгкг~ '.
Извлечение = 90 %.
I. ОТБОР ПРОБ
Orfjop проб - по ГОСТ 12430, ГОСТ 13496.0 и ГОСТ 13586.3.
2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ
Аппликатор слоев.
Камера хроматографическая.
Микрошприцы вместимостью 10—50 мм5 с градуировкой I мм3.
Пластинки стеклянные размером 200 x 200 мм.
Пульверизатор для жидкостей.
Гомогенизатор (измельчитель лабораторный).
Сито, обеспечивающее получение фракции не более 2 мм.
Источник УФ-излучения с длиной волны 330—360 им.
Аппарат для встряхивания.
Спектросротометр. обеспечивающий измерение в области длин волн 250—400 им. Шкаф сушильный, обеспечивающий регулирование температуры до 150 *С. Испаритель вакуумный роторного типа.
Весы технические с погрешностью взвешивания не более 100 мг. Весы аналитические с погрешностью взвешивания не более 0.1 мг. Воздухонагреватель (фен). Пульверизатор для жидкости стеклянный.
Баня водяная, обеспечивающая регулирование температуры до 100 'С. Насос водоструйный или другой вакуумный насос.
Колонка хроматографическая с краном, внутренним диаметром 20 мм и длиной 300 мм. Стакан В-1 -250 ТСХ по ГОСТ 25336.
ГОСТ 28396-89
Идоние офнинальнос
Перепечатка воспрещена
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
liihii-iiihjh версия
ГОСТ 28396-89 С. 2
Воронка Бюхнера диачетроч 10 си с колбой для отсасывания по ГОСТ 9147. Колбы Эрленчейера с притертой пробкой КН-1-250—14/23 ТС по ГОСТ 25336 и КН-1 -1000—14/23 ТС по ГОСТ 25336. Эксикатор 2-290 по ГОСТ 25336.
Воронки стеклянные 12-36-80 ХС и В-75-140 ХС по ГОСТ 25336. Колба мерная KI-100-2 по ГОСТ 1770. Цилиндры 1-25, 50. 100 по ГОСТ 1770.
Пипетки 2— I, 5, 10. 20 по НОРМАТИВно-технической документации.
Колба крутлодоиная с притертой пробкой К-1—250—29/32 ТС по ГОСТ 25336.
Колба Ьушена имеет им остью 500 см'.
Колба остродонная с притертой пробкой 0—25—14/23 ТС по ГОСТ 25336. Фильтры бумажные диаметром 7 и 10 см, со средней скоростью пропускания. Вата стеклянная.
Ангидрид уксусной кислоты по ГОСТ 5815. Ацетон по ГОСТ 2603.
Кислота муравьиная по ГОСТ 5848 с массовой долей 85-90 %. Бензол по ГОСТ 5955. Хлороформ по ГОСТ 20015.
¦ . 1.1.п.и ш.Lin. раствор; готовит следующим обраюч: растворяют 0.2 г о-лнани)илииа в 5 см1 муравьиной кислоты. >Фир ли лиловый. Эфир уксус ноэт иловый. Спирт этиловый по ГОСТ 5962.
Калия перманганат по ГОСТ 20490, раствор с массовой долей 1,5 %; готовят следующим образом: 1.5 г КМп04 растворяют и воле и доводят объем до 100 см3.
I и iiiK.iuMi, Д1м коли ii*.....ои хроматографии, готовят следующим обраюч: 80 г силнкаипм 60
с paiMcpou части от 0.63 до 0.20 ич сушат в течение I ч при 105 "С, посте остывания смешивают с 20 см' воды и встряхивают в ыкрыточ сосуде в течение 2 ч.
Сичнкагель для тонкослойной хроматографии, пластинки -Силуфол-.
Метанол по ГОСТ 6995.
Натрня сульфат беиюдныП по ГОСТ 4166.
Пнрнднн по ГОСТ 13647.
Кислота соляная по ГОСТ 857. раствор с массовой долей 10 56. Толуол по ГОСТ 5789. Детергента раствор, н-гсксаи.
Осушитель для эксикатора, нейтральный, например синий ie.ii,. Патулнн, аналитический стандарт. Азот или другой инертный iai
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИИ)
3.1. Приготовление хро чагографн ч ее к ой колонки
В хрочатографическую колонку на пористое стеклянное дно или стеклянную вату вносят 15 г енликагеля со смесью бен юл-укосный эфир в соотношении 3:1 по объему. После оседания силикагеля ихчншку растворителя лают стечь, следя за тем, чтобы поверхность стационарной фа оставалась покрытой растворителем.
3.2. Подготовка пластинок для тонкослойной хроматографии Тщательно моют пластики детергентом, обмывают последовательно проточной водой, затем
дистиллированной водой и этанолом и сушат на воздухе. С помошью ашиикатора наносят на пластинки равномерным слоем суспензию силикагеля в воде из РАСЧЕТа 35 г силикагеля в 70 см1 ¦оды для 5 пластинок. Толщина слоя должна быть 0.5 мм. После вотчиной сушки пластики АКТируют в сушилыюы шкафу при 110 "С в течение I ч и хранят в эксикаторе над нейтралышч осушителей.
С. 3 ГОСТ 28396-89
'Электронная версия
3.3. Приготовление растворителей для тонкослойной хроматографы и
Для проведения анализа готовят системы растворителей следующего состава:
I. Толуол — уксус ноэтиловый эфир-муравьи над кислота в объемных соотношениях 50:40:10.
II. Хлороформ-ацетон в объемных соотношениях 90:10.
III. Хлороформ-гексан-аиетон в объемных соотношениях 71:16:13.
IV. Бен юл-метанол-уксуснозтиловый эфир в объемных соотношениях 96:4:1.
V. Эфир диэтиловый.
3.4. Подготовка хроматографическоЙ камеры
В хроматографическую камеру вносят систему растворителя по п. 3.3. Толщина слоя приблизительно 8 мм. Заднюю стенку хроматографической камеры облицовывают фильтровальной бумагой, пропитанной растворителем.
3.5. Приготовление камеры для хлорирования
В хроматографическую камеру вносят 25 cmj соляной кислоты и 25 см' раствора перманганата катия и смешивают.
При этом крышка должна быть закрытой. Кроме того, в камеру ставят стеклянный предмет (например чашку Петри) для того, чтобы имелась повышенная площадка, на которую можно помещать ТСХ-пластинку, не Погружая ее в жидкость. Камеру готовят непосредственно перед проведением испытания.
3.6. Приготовление стандартного раствора патулина
Рабочий стандартный раствор патулина готовят из основного раствора. Основной раствор, содержащий 10 мкг/см1 патулина, готовят следующим образом: 1,0 мг патулина растворяют хлороформом и доводят объем до 100.0 см1.
Концентрацию патулина в основном растворе контролируют при помощи спектрофотометра. Для этого 5,0 см' основного раствора выпаривают досуха в вакуумном испарителе под азотом при 30—35 "С, сразу растворяют остаток н 5,0 см' этанола и измеряют поглощение основного раствора и этанола с толшиной поглощающего свет слоя 0,5 см при длине волны 275 им.
Концентрацию патулина (С), мкг/см'. вычисляют по формуле
„ Л - ЛУ- 1000- л:
где А — поглощение раствора патулина на длине волны 275 ни; М — молярная масса патулина, г/моль, равная 154; А — калибровочный коэффициент спектрофотометра: от 0.95 до 1,05;
с — молярный коэффициент поглощения патулина при длнне волны 275 им. равный 14600: D— длина оптического пути, см. Стандартный раствор, содержащий 2 мкг/см' патулина. готовят следующим образом: 20,0 см' основного раствора разбавляют хлороформом до 100,0 см'.
Основной и стандартный растворы патулина хранят в темной посуле при 4 'С. 3.7. Подготовка проб
Исследуемый ОБРАЗЕЦ корма измельчают, тщательно перемешивают и пропускают через
сито.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ
4.1. Получение экстрАКТа
10.0 г подготовленной пробы переносят в колбу Эрленмейера вместимостью 250 см1, добавляют 80 см-1 хлороФОРМА и 10 см' метанола, закрывают колбу и встряхивают при комнатной температуре в аппарате для встряхивания в течение I ч. Полученный экстрАКТ фильтруют через воронку Бюхнера, остаток трижды промывают порциями по 25 см' хлороФОРМА. Объединенные хлороформные экстрАКТы смешивают с безводным сульфатом натрия в количестве около 15 г и оставляют в закрытой колбе на I ч, периодически встряхивая. Затем сульфат натрия отделяют через складчатый фильтр и, во избежание потерь экстрАКТа, сульфат натрия промывают дважды порциями по 10 см' хлороФОРМА. Затем в круглодонной колбе в
-=ОКОНЧАНИЕ ФРАГМЕНТА ДОКУМЕНТА=-
Документ ГОСТ 28396-89 можно получить тремя способами:
Приобрести полный комплект актуальных документов в виде электронного справочника на DVD. Мы предлагаем специализированные справочники для разных отраслей хозяйственной деятельности.
Так же, можно скачать ГОСТ 28396-89 или любой другой документ очень быстро и за смешные деньги, с оплатой любым способом (электронными деньгами, безналичным расчетом, отправкой SMS).
Если требуется официальное издание, то можно купить ГОСТ 28396-89 - печатную форму документа для технических библиотек и лицензирования деятельности предприятия.
