Главная » Каталог документов » ГОСТ 25587-83

ГОСТ 25587-83
"Птица сельскохозяйственная. Методы лабораторной диагностики болезни Ньюкасла"

- 169,00 руб.;
- Официальное издание;
- Доставка или cамовывоз.
- от 95,00 руб./день;
- Мгновенное подключение;
- Различные формы оплаты.
- от 8 790,00 руб.;
- Тысячи (!) документов на DVD;
- Ежеквартальное обновление.

Статус документа: действующий

Дата вступления в действие: 1983-07-01


Документ относится к следующим разделам классификатора:

Нормативно-технические документы. Национальные стандарты
Сельское хозяйство
Земледелие и лесоводство *Почвоведение, анализ почв см. 13.080 *Лесозаготовки см. 79.020
Животноводство и селекция животных *Включая санитарный надзор *Ветеринария см. 11.220


Содержание для ознакомления



ВНИМАНИЕ!!
ФРАГМЕНТ ТЕКСТА ДОКУМЕНТА ПРЕДСТАВЛЕН ИСКЛЮЧИТЕЛЬНО ДЛЯ ОЗНАКОМЛЕНИЯ И СОДЕРЖИТ ОШИБКИ
ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА СООТВЕТСТВУЕТ ОФИЦИАЛЬНОМУ ИЗДАНИЮ

УДК 636: $74.8.07: 006.354 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

Групп* С79 СОЮЗА ССР

ПГИЦА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ

ГОСТ

Методы лабораторной диагностики

болезни Ньюкасла 255о/ — О «5

Agricultural poultry. Methods of laboratory diagnostics ата* toi

of Newcastle disease lCT СЭВ 1742""79<

ПОСТАНОВЛЕНИЕм Государственного комитета СССР no стандартам от 12 января 19*3 г. Mi 97 срок действия установлен

с 01.07.63 до 01.07.ВД

Несоблюдение стандарта преследуется по ЗАКОНу

Настоящий стандарт распространяется на кур, индеек, фазанов, цесарок и устанавливает методы лабораторной диагностики болезни Ньюкасла.

Стандарт применяют при диагностировании заболевания птицы в лабораториях ветеринарных научно-исследовательских учреждений.

Стандарт полностью соответствует СТ СЭВ 1742—79.

1. МЕТОДЫ ОТБОРА ПРОБ

1.1. Для выделения вируса от больной или павшей в первые 10—12 ч птицы берут головной мозг, трахею, легкие, селезенку, печень, почки.

Пробы патологического материала берут с соблюдением правил асептики в стерильную стеклянную посуду с 50%-ным раствором глицерина на дистиллированной воде.

1.2. Для определения антител в сыворотке крови берут стерильно в пробирки, увлажненные физиологическим раствором, пробы крови нз подкрыльцовой вены птиц. Полученную кровь выдерживают до образования сгустка при комнатной температуре или в ТЕРМостате при 37°С в течение I—2 ч, затем осторожно обводят иглой или пастеровской пипеткой и оставляют на 16 ч в рефрижераторе при температуре 2—4°С.

Образовавшуюся прозрачную без гемолиза сыворотку отсасывают пипеткой в стерильные пробирки.

Издание официальное

Перепечатка

31

г кг- щ
Стр. 2 ГОСТ 25587—83

С целью ретроспективной диагностики пробы крови берут через 12—14 сут после первых признаков клинического проявления болезни.

1.3. Сыворотку исследуют в течение 3 сут с момента взятия. В случае длительного хранения в сыворотку добавляют мертиолат натрия в концентрации 1 : 10000.

1.4. Пробы патологического материала и сывороток крови доставляют в лабораторию в ТЕРМосе со льдом с сопроводительным документом, содержащим данные о клинике, эпизоотологии заболевания и вскрытии трупов.

1.5. До начала лабораторного исследования патологический материал и сыворотки крови хранят в рефрижераторе при температуре 2—4°С.

2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Метод выделения вируса

Сущность метода заключается в выявлении патогенного действия вируса на эмбрионы кур, его гемагглютинирующнх свойств с последующей идентификацией серологическим методом, определении титра и вирулентности выделенного вируса.

2.1.1. Аппаратура, реАКТивы и материалы

Для проведения исследования применяют:

ТЕРМостат с температурой нагрева 37—38°С;

центрифугу лабораторную с частотой вращения 3000 об/мин;

стаканы центрифужные вместимостью 50 и 100 см3;

весы лабораторные с погрешностью взвешивания не более 0,01 г;

размельчитель тканей;

овоскоп;

колбы конические стеклянные вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770—74;

пробирки стеклянные вместимостью 10, 15 и 20 см3 по ГОСТ 25336-82;

пипетки пастеровские или пипетки стеклянные измерительные вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3 по ГОСТ 20292—74; ступку фарфоровую; шприцы с иглами; стекло кварцевое;

натрий хлористый по ГОСТ 4233—77, 0,87%-ный раствор (физиологический) с рН 7,2—7,4;

натрия гидроокись по ГОСТ 4328—77, 3%-ный раствор или другие дезинфицирующие растворы;

натрий лимоннокислый по ГОСТ 22280—76, трехзамещенный, 5%-ный раствор;

йод по ГОСТ 4159—79, 5%-ный раствор;

32
ГОСТ 25587—85 Стр. 3

антибиотики (пенициллин, стрептомицин, неовитин); парафин по ГОСТ 23683—79;

развивающиеся эмбрионы кур 9—10-суточного возраста;

эритроциты кур в физиологическом растворе, 1%-ная взвесь; готовят следующим образом: кровь берут у петухов или кур в возрасте старше 6 мес из покрыльцовой вены в колбу с физиологическим раствором лимоннокислого натрия. Полученную кровь отмывают физиологическим раствором, осаждая центрифугированием с частотой вращения 1500 об/мин в течение 10 мин. Из осадка отмытых эритроцитов готовят 1%-ную суспензию на физиологическом растворе и хранят не более 5 сут при температуре 4°С.

2.1.2. Подготовка к исследованию

Пробы патологического материала стерильно извлекают нз глицеринового раствора, трехкратно ополаскивают стерильным физиологическим раствором и гомогенизируют в стерильном физиологическом растворе в соотношении 1:5с помощью размель-чителя тканей или размельчают в ступке с кварцевым стеклом, центрифугируют с частотой вращения 1500—2000 об/мни в течение 20 мин.

Надосадочную жидкость отсасывают пипеткой и обрабатывают в течение 30 мнн при комнатной температуре антибиотиками: 1000—2000 ЕД/см3 пенициллина и 500—1000 ЕД/см3 стрептомицина для подавления посторонней микрофлоры.

2.1.3. Проведение исследования

Надосадочную жидкость исследуют в капельной реакции ге-магглютинации с 1%-ной суспензией эритроцитов кур.

Для исследования одной пробы материала заражают не менее 10 эмбрионов 9—10-суточного возраста. Контролем служат 3—5 незараженных эмбрионов.

Перед заражением эмбрионы предварительно овоскопнруют. отмечая границу пуги. Сбоку эмбриона между кровеносными сосудами отмечают участок для прокола скорлупы и инокуляции испытуемого материала. Скорлупу со стороны пуги и место прокола дезинфицируют и обрабатывают фламбированием. В центре воздушного пространства и в месте введения материала делают пробойником отверстия, затем через боковое отверстие вводят 0,2 см3 испытуемого материала на глубину 2—3 мм в аллантоис-ную полость. После заражения эмбрионов отверстия в скорлупе заливают парафином. Зараженные и контрольные эмбрионы инкубируют в ТЕРМостате в течение 120 ч при температуре 37°С.

В процессе инкубации эмбрионы овоскопнруют два раза в сутки через 12 ч. Эмбрионы, погибшие в течение первых 24 ч, уничтожают, остальные сохраняют в холодильнике при температуре 4°С.

33
Стр. 4 ГОСТ 25587—83

Через 72 ч инкубации пять эмбрионов охлаждают при температуре 4°С в течение 12—18 ч, остальные пять инкубируют до 120 ч, а затем охлаждают при 4°С в течение 16—18 ч.

Перед вскрытием эмбрионов скорлупу над воздушным пространством дезинфицируют 5%-ным раствором йода или фламби-руют, вскрывают и собирают экстраэмбриональную (аллантоис-но-амниотическую) жидкость в стерильные пробирки от каждого эмбриона отдельно. Велогенные штаммы вируса убивают куриные эмбрионы через 32—60 ч инкубации, мезогенные — через 60—90 ч, лентогенные — через 100 ч и более.

Взятые из каждого эмбриона образцы экстраэмбриональной жидкости проверяют на гемагглютинируюшую АКТивность вируса в капельной реакции гемагглютинации (РГА), которую ставят на стекле путем смешивания капли экстраэмбриональной жидкости с каплей 1%-ной взвеси эритроцитов кур.

При отсутствии РГА экстраэмбриональную жидкость, взятую в количестве 1 см3 от каждого зараженного эмбриона (не менее 5), соединяют и повторно заражают развивающиеся куриные эмбрионы 9—10-суточного возраста (не менее 10 эмбрионов).

Выделение вируса проводят в течение 3—5 пассажей на куриных эмбрионах, проверяя в каждом пассаже экстраэмбриональную жидкость на наличие гемагглютининов в капельной РГА. Если титры гемагглютининов низкие, проводят еще 2—3 дополнительных пассажа.

2.1.4. Обработка результатов

Пробу испытуемого материала считают отрицательной, если во всех проведенных пассажах не будут обнаружены гемагглюти-нация эритроцитов и патогенное действие вируса (гибель эмбрионов) .

При наличии гемагглютинации эритроцитов или гибели эмбрионов проводят идентификацию выделенного вируса, определяют титр и вирулентность вируса на эмбрионах кур.

2.2. Метод постановки реакции гемагглютинации

Сущность метода заключается в способности вируса болезни Ньюкасла агглютинировать эритроциты кур.

2.2.1. Аппаратура, материалы и реАКТивы

Для проведения исследования применяют аппаратуру, материалы и реАКТивы, УКАЗанные в п. 2.1.1 и дополнительно: микротитратор Такачи; доски из плексигласа.



-=ОКОНЧАНИЕ ФРАГМЕНТА ДОКУМЕНТА=-

Документ ГОСТ 25587-83 можно получить тремя способами:

Приобрести полный комплект актуальных документов в виде электронного справочника на DVD. Мы предлагаем специализированные справочники для разных отраслей хозяйственной деятельности.

Так же, можно скачать ГОСТ 25587-83 или любой другой документ очень быстро и за смешные деньги, с оплатой любым способом (электронными деньгами, безналичным расчетом, отправкой SMS).

Если требуется официальное издание, то можно купить ГОСТ 25587-83 - печатную форму документа для технических библиотек и лицензирования деятельности предприятия.