МУК 4.1.3158-14 Измерение массовой концентрации акролеина в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

MUK 4.1.3158-14
МУК 4.1.3158-14 Измерение массовой концентрации акролеина в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
ID 58616 *
МУК 4.1.3158-14 Измерение массовой концентрации акролеина в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии - М., формат 60х84/8, 20 стр., вес 67 гр., 1+1, обл. 4+0 (цвет.)

Методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматография для измерения массовой концентрации акролеина в крови в диапазоне концентраций от 0,1 до 5,0 мг/дм3.

Содержание

1. Назначение и область применения
2. Физико-химические и токсилогические свойства
3. Метрологические характеристики методики выполнения измерений
4. Метод измерения
5. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
6. Требования безопасности
7. Требования к квалификации оператора
8. Условия измерений
9. Подготовка к выполнению измерений
10. Выполнение измерений
11. Обработка результатов измерений
12. Оформление результатов измерений
13. Контроль качества результатов измерений

Цена печатного издания:
339 руб. 288 руб.
Доставка РФ Самовывоз МСК
* подлинность печатного издания подтверждена голографическим элементом и печатью. Внешний вид издания может отличаться от представленного изображения без изменения потребительских свойств.
Доступность для заказа: В наличии
Дата начала действия: 24 фев. 2014 г.
Дата окончания действия: 01 янв. 1989 г.
Количество страниц: 20 стр.
Статус документа: Введен впервые
Когда и где опубликован: Бюллетень нормативных актов федеральных органов исполнительной власти от 20 апреля 2009 г. N 16
Разработан:
  • ФБУН Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения
Издан:
  • Роспотребнадзор 2014 г.
  • Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора
Утвержден:
  • 24 фев. 2014 г. Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный
Ссылки в документе:
Разделы классификатора:

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовой концентрации
акролеина в крови
методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии

Методические указания

МУК 4.1.3158-14

Москва 2014

1. Разработаны: ФБУН «Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения» (Т.С. Уланова. Н.В. Зайцева, Т.Д. Карнажицкая, Е.О. Пшеничникова).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 декабря 2013 г. № 4).

3. Утверждены врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А.Ю. Поповой 24 февраля 2014 г.

4. Введены впервые.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Назначение и область применения. 2

2. Физико-химические и токсикологические свойства. 2

3. Метрологические характеристики методики выполнения измерений. 3

4. Метод измерения. 3

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы.. 3

6. Требования безопасности. 5

7. Требования к квалификации оператора. 5

8. Условия измерений. 5

9. Подготовка к выполнению измерений. 5

10. Выполнение измерений. 8

11. Обработка результатов измерений. 8

12. Оформление результатов измерений. 9

13. Контроль качества результатов измерений. 9

УТВЕРЖДАЮ

Врио руководителя Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главного государственного санитарного
врача Российской Федерации

_______________________ А.Ю. Попова

24 февраля 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовой концентрации акролеина
в крови методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии

Методические указания
МУК 4.1.3158-14

Свидетельство о метрологической аттестации № 88-16374-008-01/00076-2013 от 08.02.2013.

1. Назначение и область применения

1.1. Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для измерения массовой концентрации акролеина в крови в диапазоне концентраций от 0,1 до 5,0 мг/дм3.

1.2. Методические указания по измерению массовой концентрации акролеина в крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии предназначены для использования территориальными органами и службами Роспотребнадзора, лечебными и научными учреждениями, осуществляющими деятельность в области профпатологии и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды.

1.3. Методические указания носят рекомендательный характер.

2. Физико-химические и токсикологические свойства

Акролеин (акриловый альдегид, этиленальдегид, 2-пропеналь) - бесцветная, легко воспламеняющаяся слезоточивая жидкость с резким запахом. Выделяется в атмосферный воздух с отработавшими газами автотранспорта, в процессе горения органического топлива, при приготовлении пищи (жарение, копчение). Относится к опасным веществам. Гигиенический норматив в Российской Федерации не установлен.

Регистрационный номер CAS

107-02-8

Формула

С3Н4О

Молекулярная масса

56,06

Тпл., °С

-87,7

Ткнп., °С

52,7

Плотность при 20 °С, г/см3

0,8389

Растворимость в воде при 20 °С, %

20,85

Растворим

в этаноле, ацетонитриле, ацетоне, диэтиловом эфире

Давление насыщенных паров при 20 °С, кПа

29

ПДК, мг/дм3

отсутствует

Класс опасности

2

Краткая токсикологическая характеристика. Обладает выраженным раздражающим, общетоксическим, аллергенным, мутагенным действием. Угнетает синтез ДНК и клеточное деление, ингибирует ДНК-полимеразу. Оказывает цитотоксическое действие.

3. Метрологические характеристики методики
выполнения измерений

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значения погрешности (и её составляющих) результатов измерений не превышают значений, приведенных в табл. 1.

Таблица 1

Диапазон измерений, значения точности (правильности и прецизионности)
методики

Объект измерения

Диапазон измерений массовой концентрации акролеина, мг/дм3

Показатель точности (границы относительной погрешности), ±δ, % при Р = 0,95

Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), σr, %

Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), σR, %

Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории), r, % (при Р = 0,95 n = 2)

Кровь

0,1 - 5

30

11

15

31

Значения показателя точности используют при:

- оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;

- оценке деятельности лабораторий на качество проведения измерений;

- оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики измерений в конкретной лаборатории.

4. Метод измерения

Измерение массовой концентрации акролеина в крови основано на взаимодействии акролеина с 3-аминофенолом с образованием производного 7-гидроксихинолина и его анализе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на обращенной фазе и флуориметрическом детектировании.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг. Средняя полнота извлечения свободного акролеина из крови - 84 %.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства,
реактивы и материалы

5.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф с флуориметрическим детектором и градиентным насосом, смешивающим два компонента

Весы лабораторные равноплечие второго класса точности; наибольший предел взвешивания 200 г, диапазон взвешивания по шкале мг от 0 до 100 мг, цена деления делительного устройства - 0,05 мг, погрешность взвешивания по шкале мг ±0,15 мг

ГОСТ Р 53228-2008

Гири Г2-210

ГОСТ 7328-2001

Пипетки мерные градуированные 1-2-1-1, 1-2-1-5, 1-2-1-10

Шприц хроматографический жидкостный емкостью 10 и 50 мм3 с ценой деления 5 мм3 и погрешностью измерения 1 %

ГОСТ 29227-91

Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2

ГОСТ 1770-74

Пробирки стеклянные мерные П-2-10-14/23 ХС

ГОСТ 1770-74

Цилиндры мерные 2-100-1 с пришлифованной пробкой

ГОСТ 1770-74

Микродозаторы, с переменным объемом 100 - 1000 мм3, 1000 - 5000 мм3 и пределом допускаемой погрешности измерения не более ±2 %

pH-метр лабораторный (основная погрешность измерения не более ±0,05 единиц pH)

Секундомер механический

ГОСТ 5072-72

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

5.2. Реактивы

Акролеин, аналитический стандарт с содержанием основного компонента не менее 99,0 %

Вода дистиллированная

ГОСТ 6709-72

Ацетонитрил для хроматографии, хч

ТУ 6-09-14-2167-84

Метанол (метиловый спирт), хч

ГОСТ 6995-77

Этанол (этиловый спирт) ректификованный

ГОСТ Р 51652-2000

Кислота хлористоводородная, ампулы для приготовления 0,1 н раствора, Стандарт-титр

Кислота ортофосфорная, хч

ГОСТ 6552-80

Кислота серная, осч

ГОСТ 14262-78

3-Аминофенол для синтеза (имп.), чистота не менее 99,0 %

Железа (III) сульфат (9-водный), (имп.), содержание иона железа (III) 21 - 23 %

ТУ 2141-002-58318296-2005

Гидроксиламина гидрохлорид, чистый 7-гидроксихинолин, чистота не менее 99,0 %

ГОСТ 5456-79

Магний серно-кислый 7-водный, хч

ГОСТ 4523-77

Раствор гепарина в ампулах (5000 ед. в 1 см3)

ФС 42-1327-99

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией

5.3. Вспомогательные устройства и материалы

Хроматографическая колонка металлическая, длиной 150 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми полярными группами C18, зернение 5 мкм

Предколонка, длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми полярными группами C18, зернение 5 мкм

Сорбент для хроматографии С18

Шкаф сушильный электрический с диапазоном рабочих температур от 50 до 200 °С

ТУ 16.531.743-83

Центрифуга лабораторная с частотой вращения ротора от 500 до 2700 об./мин для пробирок вместимостью 2 см3

Устройство очистки воды, позволяющее получать воду чистоты «для жидкостной хроматографии»

Баня водяная лабораторная от 15 до 100 °С

Стаканы В-1-50-ТС, В-1-600-ТС вместимостью 50 и 600 см3

ГОСТ 25336-82

Мешалка магнитная от 120 до 1500 об./мин

Пробирки из полипропилена конические градуированные вместимостью 15 см3

Шприц медицинский одноразовый типа Люэр вместимостью 5 см3

ГОСТ Р ИСО 7886-2009

Фильтр мембранный целлюлозно-ацетатный с размером пор 0,45 мкм

Примечание. Допускается использование других вспомогательных устройств и материалов аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным.

6. Требования безопасности

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на эксплуатацию жидкостного хроматографа.

6.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией и соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83.

6.3. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже инженера-химика с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших метод измерений и получивших удовлетворительные результаты оперативного контроля процедуры измерений.

8. Условия измерений

При приготовлении градуировочных растворов и подготовке проб к анализу соблюдают следующие условия:

- температура окружающего воздуха (22 ± 2) °С;

- атмосферное давление от 84 до 106 кПа;

- относительная влажность воздуха от 30 до 80 %.

Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды, приготовление растворов, подготовка хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.

9.1. Подготовка посуды

Используемую посуду вымыть мыльным раствором, промыть проточной водопроводной водой, многократно ополоснуть дистиллированной водой и высушить при температуре 50 °С.

9.2. Приготовление растворов

9.2.1. Раствор для элюирования А. В стакан вместимостью 600 см3 вносят 500 см3 дистиллированной воды, устанавливают на магнитную мешалку, помещают в раствор электроды pH-метра, небольшими порциями с помощью стеклянной пипетки вносят концентрированную фосфорную кислоту при перемешивании до установления pH 2,5. Срок хранения раствора 5 дней.

9.2.2. Раствор для элюирования В. В мерный цилиндр 2-100-1 помещают 25 см3 метанола, доводят до 100 см3 ацетонитрилом, закрывают пришлифованной стеклянной пробкой, тщательно перемешивают. Срок хранения раствора 5 дней.

9.2.3. Элюент для хроматографии. Состав элюента задают на двух каналах насоса: смешивают раствор для элюирования А и раствор для элюирования В в соотношении 94:6 % (объемная доля).

9.2.4. Раствор 3-аминофенола, молярная концентрация 0,023 моль/дм3. В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают навеску 0,1255 г 3-аминофенола, растворяют в 40 - 45 см3 дистиллированной воды при температуре 40 - 50 °С, остужают до комнатной температуры, доводят дистиллированной водой до метки. Срок хранения раствора 30 дней в холодильнике при температуре 4 - 6 °С.

9.2.5. Раствор гидроксиламина соляно-кислого, молярная концентрация 0,043 моль/дм3. В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают навеску 0,1494 г гидроксиламина соляно-кислого, растворяют в 40 - 45 см3 дистиллированной воды, доводят дистиллированной водой до метки. Срок хранения раствора 30 дней в холодильнике при температуре 4 - 6 °С.

9.2.6. Раствор железа (III) сульфата, массовая концентрация 2,8 мг/см3. В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают навеску 0,28 г железа (III) сульфата, девятиводного, растворяют в 50 - 60 см3 дистиллированной воды, добавляют 1 см3 серной кислоты концентрированной, доводят до метки дистиллированной водой. Срок хранения раствора не ограничен.

9.2.7. Раствор серной кислоты в дистиллированной воде, 16 % (объемная доля). В термостойкий стакан вместимостью 50 см3 помещают 10 см3 дистиллированной воды и 2 см3 серной кислоты концентрированной. Осторожно перемешивают, остужают до комнатной температуры. Срок хранения раствора не ограничен.

9.2.8. Исходный раствор акролеина (раствор 1). В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают 40 - 45 см3 спирта этилового, 50 мм3 чистого акролеина (с учетом плотности 42 мг) и доводят этиловым спиртом до метки. Массовая концентрация акролеина в исходном растворе - 0,84 мг/см3. Срок хранения раствора 14 дней в холодильнике при температуре 4 - 6 °С.

9.2.9. Раствор акролеина для градуировки (раствор 2). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 40 - 45 см3 спирта этилового, 0,6 см3 исходного раствора акролеина и доводят этиловым спиртом до метки. Массовая концентрация акролеина в разбавленном растворе составляет 0,005 мг/см3. Используют свежеприготовленный раствор.

9.2.10. Раствор 7-гидроксихинолина для идентификации продукта реакции акролеина с 3-аминофенолом. В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают навеску 0,0100 г 7-гидроксихинолина, растворяют в 5 - 6 мл раствора 0,1 Н хлористоводородной кислоты, доводят до метки дистиллированной водой. Концентрация 7-гидроксихинолина в растворе составляет 100 мкг/см3. Срок хранения раствора 60 дней в холодильнике при температуре 4 - 6 °С.

9.3. Подготовка хроматографической колонки

Колонку устанавливают в хроматограф, подают ацетонитрил со скоростью 0,2 см3/мин в течение 0,5 ч, затем подают элюент состава: 94 % (объемная доля) раствора для элюирования А, 6 % (объемная доля) раствора для элюирования В со скоростью 0,2 см3/мин до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора. Проводят холостую разгонку с установлением ступеней градиента: 6 мин - 6 % раствора В, 13 мин - 8 % раствора В, 17 мин - 10 % раствора В, 22 мин - 20 % раствора В с увеличением скорости подвижной фазы до 0,5 см3/мин, 36 мин - остановка разгонки.

9.4. Построение градуировочной характеристики

9.4.1. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика 7-гидроксихинолина (дериват акролеина) от массовой концентрации акролеина в крови устанавливают методом абсолютной градуировки по трем сериям растворов. Каждую серию, состоящую из шести градуировочных растворов, готовят из раствора акролеина для градуировки № 2, приготовленного по п. 9.2.9.

9.4.2. Градуировочные растворы готовят в стеклянных пробирках с притертой пробкой вместимостью 10 см3. Для этого в каждую пробирку вносят 0,25 см3 цельной крови с гепарином, раствор акролеина для градуировки и этанол в соответствии с табл. 2. В соответствии с п. 11 проводят анализ холостой пробы. При наличии анализируемого вещества в холостой пробе вычитают его фоновое содержание при построении градуировки.

Таблица 2

Градуировочные растворы для определения акролеина в крови

Номер раствора

1

2

3

4

5

6

Объем раствора акролеина для градуировки (С = 0,005 мг/см3), см3

0,005

0,015

0,035

0,050

0,125

0,25

Объем этанола, см3

0,245

0,435

0,215

0,200

0,125

0

Массовая концентрация акролеина в крови, мг/дм3

0,1

0,3

0,7

1,0

2,5

5,0

Проводят реакцию дериватизации для перевода акролеина в форму производного (7-гидроксихинолина). В каждую пробирку с градуировочным раствором добавляют 2 см3 раствора 3-аминофенола, 2 см3 раствора гидроксиламина соляно-кислого, 0,1 см3 раствора сульфата железа, 0,2 см3. раствора серной кислоты. Пробирки закрывают пробкой и тщательно перемешивают содержимое интенсивным встряхиванием. Пробирки нагревают на водяной бане 15 мин при температуре 100 °С, периодически открывая пробки. После охлаждения очищают прореагировавшую смесь способом твердофазной экстракции. Для этого в пробирку добавляют 0,35 г магния серно-кислого 7-водного и 0,05 г сорбента для хроматографии С18, интенсивно встряхивают смесь в течение 1 мин, переносят в конические пробирки из полипропилена и центрифугируют 10 мин со скоростью 2000 об./мин. Надосадочный слой отбирают и пропускают через пористый фильтр (размер пор 0,45 мкм), используя шприц медицинский типа Люэр, фильтрат собирают в виалу, анализируют 20 мм3 экстракта в рабочем режиме хроматографа.

9.4.3. Режим работы хроматографа:

- колонка 4,6 мм ×150 мм, заполненная сорбентом С18;

- элюент: 94 % раствора А, 6 % раствора В;

- градиент элюирования: 6 мин - 6% раствора В, 13 мин - 8 % раствора В, 17 мин - 10 % раствора В, 22 мин - 20 % раствора В, 30 мин - остановка разгонки, время после анализа - 6 мин;

- скорость движения элюента

0,2 см3/мин;

- флуориметрический детектор:

- длина волны возбуждения

243 нм

- длина волны эмиссии

501 нм

- температура термостата колонки

27 °С.

Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле:

Ci - массовая концентрация акролеина в градуировочном растворе, мг/дм3;

Si - среднее значение трех измерений площади пика акролеина в форме его производного (7-гидроксихинолина), полученное при анализе i-го градуировочного раствора, условные единицы (уcл. ед.);

n - количество градуировочных смесей (n = 6).

Градуировку проводят при смене реактивов или разделительной колонки.

9.4.4. Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал в анализируемой серии измерений. Образцами для контроля стабильности являются градуировочные растворы, выбранные таким образом, чтобы массовая концентрация акролеина соответствовала нижней, верхней границам и середине диапазона построения градуировочной характеристики. Градуировка признается стабильной при выполнении условия:

|Cm - C| ≤ 0,15C, где

(1)

С - заданная массовая концентрация акролеина в градуировочном растворе;

Cm - результат измерения массовой концентрации акролеина в образце для градуировки.

При невыполнении условия (1) стабильности градуировочной характеристики эксперимент повторяют с другим градуировочным раствором. При повторном невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики.

10. Выполнение измерений

10.1. Отбор проб

Отбирают пробу крови объемом 1 см3 в пробирку, содержащую 0,025 см3 гепарина. Отобранные пробы хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С, срок хранения проб 8 ч.

10.2. Порядок выполнения измерений

Выполняют два параллельных измерения массовой концентрации акролеина в образце крови. Для этого в стеклянные пробирки с притертой пробкой вместимостью 10 см3 вносят по 0,25 см3 пробы крови, добавляют 0,25 см3 этанола, 2 см3 раствора 3-аминофенола, 2 см3 раствора гидроксиламина соляно-кислого, 0,1 см3 раствора сульфата железа, 0,2 см3 раствора серной кислоты, закрывают пробкой. Смесь интенсивно встряхивают, нагревают на водяной бане 15 мин при температуре 100 °С, периодически открывая пробирки. После охлаждения очищают прореагировавшую смесь способом твердофазной экстракции. Для этого в каждую пробирку добавляют 0,35 г магния серно-кислого 7-водного и 0,15 г сорбента для хроматографии C18, интенсивно встряхивают смесь в течение 1 мин, переносят в конические пробирки из полипропилена и центрифугируют 10 мин со скоростью 2000 об./мин. Надосадочный слой отбирают и пропускают через пористый фильтр (размер пор 0,45 мкм), используя шприц медицинский типа Люэр, фильтрат собирают в виалу, анализируют 20 мм3 экстракта в рабочем режиме хроматографа.

11. Обработка результатов измерений

11.1. Массовую концентрацию акролеина в крови (мг/дм3) вычисляют по формуле:

С = SiK, где

С - массовая концентрация акролеина в анализируемой пробе, мг/дм3;

Si - площадь пика 7-гидроксихинолина на хроматограмме, (усл. ед.);

K - градуировочный коэффициент.

11.2. За результат измерения принимают среднее арифметическое значение двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости C1, С2 (параллельных определений), для которых выполняется условие:

(2)

r - предел повторяемости. Значения предела повторяемости приведены в табл. 3.

При невыполнении условия (2) получают дополнительно еще два результата измерений. За результат измерений принимают среднее арифметическое четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, для которых выполняется условие:

(3)

CR0,95(4) - критический диапазон. Значения критического диапазона приведены в табл. 3.

Таблица 3

Значения пределов повторяемости, воспроизводимости и критического
диапазона при доверительной вероятности Р = 0,95

Диапазон измерений, мг/дм3

Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в условиях повторяемости), r, %

Критический диапазон (относительное значение допускаемого расхождения между наибольшим и наименьшим четырех результатов измерений, полученных в одной лаборатории в условиях повторяемости), CR0,95(4), %

Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, %

От 0,1 до 5 вкл.

31

40

42

При невыполнении условия (3) в качестве окончательного результата измерений принимают медиану четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (параллельных определений). Выявляют и устраняют причины, приводящие к невыполнению условий (2) и (3).

12. Оформление результатов измерений

Результат измерений представляют в виде ( ± Δ) мг/дм3, где

- средний результат измерений, мг/дм3;

Δ - характеристика погрешности, мг/дм3 при Р = 0,95, значение Δ рассчитывают по формуле:

δ - относительное значение характеристики погрешности, % (приведено в табл. 1).

13. Контроль качества результатов измерений

Контроль качества результатов измерений в пределах лаборатории организуют и проводят путем проведения оперативного контроля процедуры измерений и контроля стабильности результатов измерений в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)-2002 и РМГ 76-2004.

Периодичность получения результатов контрольных процедур и формы их регистрации приводят в документах лаборатории, устанавливающих порядок и содержание работ по организации методов контроля стабильности результатов измерений в пределах лаборатории.

13.1. Алгоритм оперативного контроля процедуры измерений
с использованием метода добавок

Оперативный контроль процедуры измерений с использованием метода добавок проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры Kk с нормативом контроля K.

Результат контрольной процедуры Kk рассчитывают по формуле

- результат измерений массовой концентрации акролеина в пробе с известной добавкой - среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию (2);

- результат измерений массовой концентрации акролеина в исходной пробе - среднее арифметическое двух результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, расхождение между которыми удовлетворяет условию (2).

Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

, - значения характеристики погрешности результатов измерений, установленные в лаборатории при реализации методики, соответствующие массовой концентрации акролеина в пробе с известной добавкой и в исходной пробе соответственно.

Примечание. Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения: Δл = 0,84Δ, с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений.

Процедуру измерений признают удовлетворительной при выполнении условия:

KkK

(4)

При невыполнении условия (4) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (4) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.2. Алгоритм проведения контрольной процедуры
при контроле внутрилабораторной прецизионности

Образцами для контроля внутрилабораторной прецизионности являются пробы крови (рабочие пробы).

При реализации контрольной процедуры получают два результата контрольных измерений (первичного и повторного ) массовой концентрации акролеина в условиях внутрилабораторной прецизионности.

Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении следующего условия:

(5)

и - результаты измерений массовых концентраций акролеина, полученные в условиях внутрилабораторной прецизионности, т.е. в одной лаборатории в разное время, разными операторами;

Rл- предел внутрилабораторной прецизионности, значения предела внутрилабораторной прецизионности приведены в табл. 4.

При невыполнении условия (5), процедуру повторяют. При повторном превышении предела внутрилабораторной прецизионности выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

Таблица 4

Значения предела внутрилабораторной прецизионности
при доверительной вероятности Р = 0,95

Диапазон измерений, мг/дм3

Предел внутрилабораторной прецизионности (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в разное время, разными операторами), Rл %

От 0,1 до 5 вкл.

34

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений,
получаемых в условиях воспроизводимости

Образцами для проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости, являются образцы крови с внесенными в них добавками аттестованного раствора акролеина, подготовленные в соответствии с п. 9.4.2.

Проверку приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости, проводят по результатам измерений массовых концентраций акролеина из образцов крови (специально подготовленные образцы крови с внесенными добавками аттестованного раствора акролеина) с одинаковым содержанием акролеина.

Результаты измерений признают приемлемыми при выполнении условия

(6)

и - результаты измерений массовых концентраций акролеина (средние арифметические параллельных определений), полученные в условиях воспроизводимости, т.е. в разных лабораториях;

R - предел воспроизводимости, значения предела воспроизводимости приведены в табл. 3.

При выполнении условия (6) результаты измерений, полученные в двух лабораториях, являются совместимыми и может быть рассчитано общее среднее арифметическое результатов измерений, полученных в двух лабораториях.

При невыполнении условия (6) могут быть проведены процедуры проверки приемлемости согласно раздела 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

Страница 1 из 20
Страница 2 из 20
Страница 3 из 20
Страница 4 из 20
Страница 5 из 20
Страница 6 из 20
Страница 7 из 20
Страница 8 из 20
Страница 9 из 20
Страница 10 из 20
Страница 11 из 20
Страница 12 из 20
Страница 13 из 20
Страница 14 из 20
Страница 15 из 20
Страница 16 из 20
Страница 17 из 20
Страница 18 из 20
Страница 19 из 20
Страница 20 из 20
Поиск ГОСТов и технической литературы
Нет времени искать? Запрос цен и КП (отвечаем оперативно)